荧光显微镜背景太绿怎么调

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采用荧光显微镜在不同波段激发下进行免疫荧光标记时，荧光显微镜背景太绿怎么调，极大地降低实验图片的可用性和美观性，可能的原因以及解决措施如下：
组织切片太厚：这种情况下可以选择将组织切成适当的薄块（厚度不要超过5mm）后进行固定。
封闭不佳：封闭的目的就是为了减少非特异性的结合，减少背景染色。如果背景太强，可以考虑换种封闭液或者增加封闭孵育的时间
标本的固定时间太久：标本的固定时间不是越久越好，常规固定1-2天即可，千万不要采用长期浸泡在固定液中的组织进行免疫荧光标记实验。
自发荧光：标本常规采用中性的多聚甲醛固定，而醛类固定剂会与胺和蛋白反应生成荧光产物，因此避免使用戊二醛固定，或者使用含0.1% 氢硼化钠的PBS洗涤以除去游离的醛基。还有些荧光来自内源性的荧光分子，可以用苏丹黑/硫酸铜进行光漂白。
荧光显微镜背景太绿怎么调？如何从根本上避免荧光背景出现的问题，第一种，现在很多的显微镜供应商都供应了含DAPI的封片剂，不仅可以染核，还有防止荧光淬灭的成分，可以避免这种情况。第二种就是选购共聚焦显微镜，其采集效果是要优于普通荧光显微镜的。

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