激光共聚焦荧光显微镜的原理及应用

为了解决大家在激光共聚焦荧光显微镜的问题，广州明慧科技为您梳理关于激光共聚焦荧光显微镜的相关知识。
激光扫描共聚焦荧光显微镜技术的主要应用范围
1. 组织和细胞中的定量荧光测定
常用于原位分子杂交、肿瘤细胞凋亡观察、单个活细胞水平的 DNA 损伤及修复等定量分析。
2. 细胞间通讯的研究
用于研究胚胎发生、生殖发育、神经生物学、肿瘤发生等过程中缝隙连接通讯的基本机制和作用，也可用于鉴别对缝隙连接作用有潜在毒性的化学物质。
3. 细胞物理化学测定
能对细胞的溶酶体、线粒体、内质网、细胞骨架、结构性蛋白质、DNA、RNA、酶和受体分子等细胞内特异结构的含量、组分及分布进行定量、定性、定时及定位测定。
4. 细胞内钙离子和 pH 值动态分析
利用荧光探针，激光扫描共聚焦显微镜可以测量单个细胞内 pH 和多种离子(Ca2+、K+、Na+、Mg2+)在活细胞内的浓度及变化。

5.三维图像的重建

6.荧光漂白恢复技术
可通过观察已发生荧光漂白细胞其荧光恢复过程的变化量来分析细胞内蛋白质运输、受体在细胞膜上的流动和大分子组装等细胞生物学过程。
7.长时程观察细胞迁移和生长
8.在细胞及分子生物学基础研究中的应用
CLSM 还可以对贴壁的单个细胞或细胞群的胞内、胞外荧光作定位、定性、定量及实时分析，并对胞内成分如线粒体、内质网、高尔基体、DNA、RNA、Ca2+、Mg2+、Na+ 等的分布、含量等进行测定及动态观察，使细胞结构和功能方面的研究达到分子水平。
9.在肿瘤和抗癌药物筛选研究中的应用
 CLSM 则可对单标记或者多标记细胞、组织标本及活细胞进行重复性极佳的荧光定量分析，从而对肿瘤细胞的抗原表达、细胞结构特征，抗肿瘤药物的作用及机制等方面定量化。
10.在血液病学和医学免疫学研究中的应用
准确细胞定位的同时有效鉴定免疫细胞的性质。
11.在大脑和神经科学中的应用
激光扫描共聚焦显微镜能观察神经轴突的三维结构，因此应用 CLSM 有可能观察到普通光镜下未能发现的神经组织的细微病变。
12.在眼科研究中的应用
利用激光扫描共聚焦显微镜可以观察晶状体，角膜、视网膜、虹膜和睫状体的结构和病理变化。
13.在骨科研究领域中的应用
CLSM在观测骨细胞形态学研究、骨细胞特异性蛋白（骨钙素）以及骨细胞之间的相互作用具有显著的优势。
常用激光器
激光扫描共聚焦显微镜使用的激光光源有单激光和多激光系统，常用的激光器包括以下三种类型：
半导体激光器：405nm（近紫外谱线）
氩离子激光器：457nm、477nm、488nm、514nm（蓝绿光）
氦氖激光器：543nm（绿光-氦氖绿激光器）633nm（红光—氦氖红激光器）
UV激光器（紫外激光器）：351nm、364nm（紫外光）

耐可视NCF950激光共聚焦荧光显微镜——多路探测通道的滤光片型共聚焦显微镜，集成4路光源和探测器（405，488，561，640），结合4路荧光融合技术，实现实时多通道融合观测和捕捉，也可根据用户需要进行激光器数量和激光中心波长的选择。提供多种电动运动部件，包括：电动平台、电动调焦、电动物镜转盘、电动荧光转盘、电动聚光镜和电动调光，操作方式同时兼容按钮操作和软件操作，并且提供调用命令，方便用户自行控制和开发。便捷的交互方式和多种操控方式可以满足从初学者到专业用户的不同使用需求。结合该系统产品强大的软硬件交互式自动化特点，大大简化整套 实验流程，利用配套的 NOMIS Advanced C 能轻松实现三维结构的生成和多区域的经时分析等分析功能。